Hiivan soluseinä sisältää pääasiassa glukaania, sekä jonkin verran mannoproteiinia, proteiinia, lipidejä ja pienen määrän kitiiiniä. Hiivaglukaani on pääasiassa alkaliin liukenematonta glukaania. Alkaliin liukenematon glukaani on aktiivinen polysakkaridi. Valmistuksen avain on poistaa epäpuhtaudet, kuten proteiini, mannaani ja lipidit. Tällä hetkellä tärkeimmät menetelmät hiivaglukaanin valmistamiseksi kotimaassa ja ulkomailla ovat happo-emäsmenetelmä, entsymaattinen menetelmä ja oksidatiivinen uutto.
1.1 Happo-emäsmenetelmä
Mannaners[1] käytti ensimmäisen kerran happo-emäsmenetelmää glukaanin uuttamiseen hiivasta, ja Williamsin et al.:n parantamisen jälkeen on muodostunut vakaa prosessi. CHUNGin [2] tutkima alkalikäsittelyprosessi: Ota 80 g hiivasoluseinämää ja suspendoi se 1000 ml:aan 4 % NaOH-liuosta, pidä 95 asteessa 1 h, sentrifugoi, suspendoi liukenematon aines 2000 ml:aan 3 % NaOH-liuosta, säilytä 75 asteessa 3 h, sentrifugoi, suspendoi liukenematon aines tislattuun veteen, käytä suolahappoa pitämään pH 4,5:ssä, pidä 75 asteessa 1 h, sentrifugoi, pese, dehydroi ja kuivaa hiivaglukaanin saamiseksi. Happokäsittelyssä hapon valinnalla on suuri vaikutus glukaanin saantoon. Happo on liian heikko, ja happoliukoinen glykogeeni ja beeta-1,6-glukaani eivät poistu kokonaan; Liian voimakas happamuus johtaa emäksiin liukenemattoman glukaanin hajoamiseen ja vähentää saantoa, joten etikkahappo on paras valinta pH:n säätämiseen=4,5.
1.2 Entsyymimenetelmä
Freimund [3] käsittelee entsymaattista menetelmää hiivasolun seinämän valmistukseen hiivaglukaanin valmistamiseksi: Ota 1,3 kg hiivasoluseinämää ja lisää 8,8 l vettä, säädä pH=7.0, pidä 125 asteessa 5 tuntia , pese kahdesti sentrifugoinnin jälkeen, lisää vettä 10 litraan liukenematonta ainetta, käsittele alkalisella proteaasilla - Savinaasilla 5 tuntia, sentrifugoi, pese ja kuivaa ja pese sitten etanolilla tai asetonilla saadaksesi dekstraaninäytteitä, joiden pitoisuus on yli 85 %. Tang Zhiyu [4] uutti hiivan soluseinän entsyymi-alkaliyhdistelmämenetelmällä, käsitteli autolysoitunutta hiivaa papaiinilla 18 tuntia, keräsi ja saosti ja käsitteli 2 % NaOH:lla 3 tuntia korkeassa lämpötilassa. Näytteen polysakkaridipitoisuus oli yli 87 % ja saanto 10 %. Zhao Guangyuan [5] käsitteli hiivasolun seinämää proteaasilla 57 asteessa 24 tuntia, sitten sentrifugoi sakkaa 2 % NaOH:lla 60 asteessa 3,5 tuntia, sentrifugoi, pestiin ja kuivattiin hiivaglukaaninäytteen saamiseksi.
Hiivan soluseinän entsymaattinen käsittely voi poistaa suuren määrän proteiinia, mikä vähentää myöhemmän alkalin pitoisuutta ja käyttöä. Hiivaglukaanituotteen molekyylirakenne on täydellisempi, ja glukaanin molekyylirakenne liittyy läheisesti sen biologiseen aktiivisuuteen. Siksi entsymaattinen menetelmä soveltuu paremmin suuren mittakaavan hiivaglukaanin uuttamiseen ja puhdistamiseen.
[1] Manners, DJ, Masson, AJ ja Patterson, JC (1973a). -(1-3)-D-glukaanin rakenne hiivan soluseinistä. Biochemical Journal, 135(1):19-30.
[2] CHUNG, Bong - Hyun. PARK, Jeong Hoon.et ai. 1. Koostumus, joka sisältää liukoista glukaanioligomeeriä Saccharomyces cerevisiae IS2:sta immuuniaktivaatioon tai syövän ehkäisyyn ja hoitoon ja valmistusmenetelmä. PCT [P]: App l. WO2004.
[3] Freimund, S., Sauter, M., Kappeli, O., & Dulter, H. (2003). Uusi hajoamaton eristysprosessi erittäin puhtaalle 1,3-bD-glukaanille Saccharomyces cerevisiae -hiivasta. Carbohydrate Polymers, 54, 159-171.
[4] Tang Zhiyu, Wang Huai, Xiong Shanbai. Oluthiivan uuttaminen autolyysi-entsyymi-alkalimenetelmällä - Tutkimus 1,3-glukaanin [J] prosessista. Moderni elintarviketiede ja -teknologia, 2006 (02)
[5] Zhao Guangyuan. Tutkimus emäksiin liukenemattoman glukaanin valmistamisesta jäteoluthiivan autolyysijäännöksestä [J]. Journal of Huazhong Agricultural University (Natural Science Edition), 1997 (2)
